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气溶胶
气溶胶是一种重要的传染源,应小心操作以减少气溶胶的形成和扩散范围。许多实验室操作都可能生成有害的气溶胶,例如在对感染性物质进行掺和、混合、研磨、振摇、搅拌、超声处理以及离心的时候。
因此,即使使用了安全设备,可能时也最好在经认证的生物安全柜中进行这些操作。
有关生物安全柜及其使用和测试的问题在第10 章中已进行了讨论。只有训练有素的操作者在采用正确的技术时,才能保证安全设备可以起到保护作用。同时,应该定期对安全设备进行测试以确保其持续安全地运行。
负压柔性薄膜隔离装置
负压柔性薄膜隔离装置是一种对生物学危害性材料提供最佳防护的基本防护装置。该装置可以装在移动架上,将工作空间用透明聚氯乙烯(PVC)完全包裹起来悬挂在钢架结构上,并使隔离装置的内压始终维持在低于大气压力的水平。该装置入口处的空气要经一个HEPA 过滤器过滤,而出口处的空气则要通过两个HEPA 过滤器过滤,因此不必再用管道将空气排到建筑物外面。
该隔离装置可以配备培养箱、显微镜和其他实验室仪器,例如离心机、动物笼具、加热设备等。实验物品可以通过进样和取样口运入或运出隔离装置,而不影响其微生物学安全性。操作时戴套袖外加一次性手套。要安装压力计来检测隔离装置内的压力。
在常规的生物安全柜不能或不适合安装或维护的现场,可以采用柔性薄膜隔离装置来进行高危险生物体(危险度3 级或4 级)的操作。
移液辅助器
在吸取操作时通常必须使用移液辅助器。必须严格禁止用口吸取液体。移液辅助器的重要性无论怎么强调都不过分。最常见的移液操作危害都是用口吸取液体造成的。许多与实验室有关的感染都是经口吸入和食入危险性物质所造成的。
如果用已污染的手指放到吸管吸入端,用口吸液时可能将病原体传播到口中。不太为人所知的是,用口吸液时会有形成气溶胶的危险。在负压或正压条件下,棉花塞子并不能有效地过滤微生物,颗粒仍有可能通过它被吸入。当塞子塞得很紧时,吸取的时候可能要更用力,反而会导致塞子、气溶胶甚至液体被吸出。采用移液辅助器可以避免操作人员吸入病原体。
当液体从吸管掉落到工作台面上,或交替地吸或吹培养物,以及从吸管中将最后一滴液体吹出来的时候,也都能够产生气溶胶。在生物安全柜中进行上述操作可以防止吸入在吸液时不可避免产生的气溶胶。
选择移液辅助器时应该格外小心。移液辅助器的设计和使用不应该产生其他的感染性危害,同时还要易于灭菌和清洁。在操作微生物和细胞培养物时,应使用塞紧(防气溶胶)的吸头。由于末端破碎或有裂口的吸管会影响与移液辅助器底座的密封并因此产生危害,故不应使用这样的吸管。
匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器
家用(厨房用)匀浆器的密封不严并可释放气溶胶,应该只使用专为实验室设计的、结构上可以最大限度地减少或避免气溶胶释放的仪器设备。现在已有不同大小的消化器(stomacher)可供使用,但也有生成气溶胶的危险性。
当用匀浆器处理危险度3 级的微生物时,通常应该在生物安全柜中进行装样及重新开启。
超声处理器可能释放气溶胶,应该在生物安全柜中进行操作,或者在使用期间用护罩盖住。
在使用后应该清除护罩和超声处理器的外部污染。
一次性接种环
一次性接种环的优点是无需灭菌,因此可以在生物安全柜中使用。否则,使用本生灯和微型加热器会扰乱气流。一次性接种环使用后应置于消毒剂中,并按污染性废弃物处理。
微型加热器
气体和电加热的微型加热器配有硼硅酸玻璃或陶瓷保护罩,从而减少接种环灭菌时感染性物质的飞溅和散布。但微型加热器会扰乱气流,因此应置于生物安全柜中靠近工作表面后缘的地方。
个体防护装备和防护服
个体防护装备和防护服是减少操作人员暴露于气溶胶、喷溅物以及意外接种等危险的一个屏障。可根据所进行工作的性质来选择着装和装备。在实验室中工作时,必须穿着防护服。在离开实验室前,要脱下防护服并洗手。表11 汇总了在实验室中使用的一些个体防护装备及其所能提供的保护。
实验服、隔离衣、连体衣、围裙
实验服最好应该能完全扣住。而长袖、背面开口的隔离衣、连体衣的防护效果要比实验服好,
因此更适用于在微生物学实验室以及生物安全柜中的工作。在必须对血液或培养液等化学或生物学物质的溢出提供进一步防护时,应该在实验服或隔离衣外面穿上围裙。衣物洗烫工作应在实验室机构内或就近进行。
实验服、隔离衣、连体衣或围裙不得穿离实验室区域。
护目镜、安全眼镜和面罩
要根据所进行的操作来选择相应的装备,从而避免因实验物品飞溅对眼睛和面部造成的危害。制备屈光眼镜(prescription glasses)或平光眼镜配以专门镜框,将镜片从镜框前面装上,这种镜框用可弯曲的或侧面有护罩的防碎材料制成(安全眼镜)。安全眼镜即使侧面带有护罩也不能对喷溅提供充分的保护。护目镜应该戴在常规视力矫正眼镜或隐形眼镜(它们对生物学危害没有保护作用)的外面来对飞溅和撞击提供保护。面罩(面具)采用防碎塑料制成,形状与脸型相配,通过头带或帽子佩戴。护目镜、安全眼镜或面罩均不得戴离实验室区域。
防毒面具
当进行高度危险性的操作(如清理溢出的感染性物质)时,可以采用防毒面具来进行防护。根据危险类型来选择防毒面具。防毒面具中装有一种可更换的过滤器,可以保护佩戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物的影响。过滤器必须与防毒面具的正确类型相配套。为了达到理想的防护效果,每一个防毒面具都应与操作者的面部相适合并经过测试。具有一体性供气系统的配套完整的防毒面具可以提供彻底的保护。在选择正确的防毒面具时,要听从专业卫生工作者等有相应资质人员的意见。外科面罩在设计上只能保护病人,而不能对工作人员提供呼吸保护。有些单独使用的一次性防毒面具(ISO 13.340.30)设计用来保护工作人员避免生物因子暴露。
防毒面具不得戴离实验室区域。
手套
当进行实验室操作时,手可能被污染,也容易受到“锐器”伤害。在进行实验室一般性工作,以及在处理感染性物质、血液和体液时,应广泛地使用一次性乳胶、乙烯树脂或聚腈类材料的手术用手套。可重复使用的手套虽然也可以用,但必须注意一定要正确冲洗、摘除、清洁并消毒。
在操作完感染性物质、结束生物安全柜中工作以及离开实验室之前,均应该摘除手套并彻底洗手。用过的一次性手套应该与实验室的感染性废弃物一起丢弃。
实验室或其他部门工作人员在戴乳胶手套,尤其是那些添加了粉末的手套时,曾有发生皮炎及速发型超敏反应等变态反应的报道。应该配备替代加粉乳胶手套的品种。
在进行尸体解剖等可能接触尖锐器械的情况下,应该戴不锈钢网孔手套。但这样的手套只能防止切割损伤,而不能防止针刺损伤。
手套不得戴离实验室区域。
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