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一、什么是植物组织培养呢?
植物组织培养是在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于 液体培养基中进行震荡培养,得到分散成游离 的悬浮细胞,通过继代培养使 细胞增殖,从而获得大量细胞群体的一种技术。
一、为什么要分离培养植物组织或细胞?
1、植物细胞的培养在研究细胞的增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡等方面都是重要的研究手段,且是细胞信号转导、起源、基因表达与调控方面的基础研究条件。
2、可以从植物细胞培养中获得香料、药品、食品添加剂。
3、扩大了植物繁殖途径,便于无性微繁体系的保存,对珍惜濒危物种保护有重大意义,有利于种子繁殖率低的植物的保护,便于工厂化生产等
三、植物组织培养应该怎么做?
1、外植体的选择和预处理
(1)外植体:外植体是指从植物体上取出的用于无菌培养或直接分离细胞的部分植物组织或器官,我们可以从植物体的各个部位都可以成功地获得植物细胞,但是不同植物、不同器官的脱分化和再分化能力不同,分离细胞和原生质体的难易和效果也有很大差异。
(2)无菌和消毒:通常应当选择生长正常、无病虫害的植株,并从中选择适宜的组织器官作为外植体,主要包括:茎尖、茎段及叶片的消毒处理 果实及种子的消毒处理 根及地下贮藏器官等的消毒处理 花药的消毒处理 外植体的其他处理
2、愈伤组织的形成和形态发生
植物细胞的全能性在发育和分化的过程中并不会丧失,但在完整的植株中每个细胞都是组织的一员。几乎所有高等植物细胞,一旦脱离了母体植株,摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约,在不定期下的培养条件下,就会发生一种回复变化,从而失去分化状态,变为分生细胞,实现脱分化过程。
然后,这些脱分化细胞经过连续的有丝分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的形成主要分为诱导期、分裂期、形成期三个时期。植物愈伤组织
3、愈伤组织的继代培养
脱分化细胞不断进行分裂,从而形成了愈伤组织,愈伤组织在培养基上生长一段时间以后,由于营养物质枯竭,水分散失,以及代谢产物的积累,必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代