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作者:admin 时间:2015-08-31 08:11:58
产品简介:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
D2722 | pCMV-N-Flag | 1μg |
pCMV-N-Flag是晶安生物自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的
蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使 用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Flag质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide &nb sp; Position
CMV promoter &nb sp; 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
Flag tag &nb sp; 679–702
multiple cloning site 705 –778
T7 promoter and T7 primer binding site 821–842
SV40 polyA signal &nb sp; 854–1237
f1 origin of ss-DNA replication 1375–1681
bla promoter &nb sp; 1706–1830
SV40 promoter &nb sp; 1850–2188
neomycin/kanamycin resistance ORF 2223–3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3015–3473
pUC origin &nb sp; 3602–4269
pCMV-N-Flag质粒的图谱如下:
pCMV-N-Flag的多克隆位点的详细图谱如下:
&nb sp; Flag tag
SacI M D Y K D D D D K
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA TTACAAGGAT GACGACGATA
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT AATGTTCCTA CTGCTGCTAT
XmaI PstI
SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII
701 AGAGCCCGGG CGGATCCAAG CTTCTGCAGG AATTCGATAT CGTCGACAGA
TCTCGGGCCC GCCTAGGTTC GAAGACGTCC TTAAGCTATA GCAGCTGTCT
XhoI XbaI ApaI
751 TCTCTCGAGT CTAGAACTAG TGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTAC
AGAGAGCTCA GATCTTGATC ACCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATG
pCMV-N-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I
Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I
Sca I Spl I
pCMV-N-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Pvu I CG,AT`CG 855 |
pCMV-N-Flag质粒中对于插入片断进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-Flag的全序列信息: D2722 pCMV-N-Flag-seq.txt
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
D2722 |
pCMV-N-Flag |
1μg |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经晶安生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。